超星生物化学实验_13期末答案(学习通2023题目答案)
实验室安全培训
1、超星实验室使用过的生物实验实验动物尸体的处理为（）
A、统一收集，化学统一处理
B、期末普通生活垃圾桶
C、答案医疗废弃物垃圾桶
D、学习利器盒
2、通题乙醇、目答盐酸、超星氯仿等挥发性液体应该存放在
A、生物实验易燃易爆专用试剂柜
B、化学冰箱
C、期末普通试剂柜
D、答案干燥通风厨
3、学习高温干热灭菌适用于（ ）物品的通题灭菌
A、玻璃器皿
B、培养基
C、不能高温灭菌的溶液
D、塑料制品
4、灭菌锅的使用错误的是（）
A、在灭菌锅温度低于80度以内都可将灭菌锅打开
B、检查灭菌锅排气贮存桶的水位
C、灭菌的物品需要分类，且确保灭菌条件一致
D、灭菌完毕，确认压力表位于0帕，温度低于80度才可将灭菌锅缓慢打开
5、有关实验室内常规操作，以下说法错误的是（ ）
A、课后进入实验室无需穿戴实验服和防护措施。
B、使用挥发性的有机试剂或有毒有害试剂时必须佩戴口罩在通风橱内操作。
C、接触有毒有害试剂的手套应及时处理，不可接触其它区域。
D、使用注射器、解剖针、解剖刀等利器时，不可互相传递，用完及时收好，不可随意放置。
6、下面所列实验室常用试剂不可存放于冰箱的是（ ）
A、无或具有少量挥发性的试剂
B、非易燃易爆的液体和固体
C、干净的培养基 (
D、动植物标本样品
7、实验过程中产生的有毒有害的废弃物的正确处理方法是（ ）
A、.按照实验教师指示，统一进行处理；
B、直接放入医疗垃圾废弃物箱；
C、经灭菌后放入医疗垃圾废弃物箱；
D、.暂时存放在某地，等待教师统一处理；
8、实验室常用下列设备中，不可过夜使用的设备有（
A、通风橱
B、培养箱
C、医用冰箱
D、孵卵器
9、实验完毕后，个人应值日的范围是（ ）
A、个人及小组成员使用的实验区域
B、教室的公共区域
C、仪器设备的清洁和电源关闭
D、实验垃圾的清理
10、实验过程中出现意外伤害时的危机处理方法，以下说法正确的是（ ）
A、实验动物咬伤后用清水清洗伤口，用碘伏消毒后到医院打疫苗。
B、化学试剂逸撒后，主要没有溅到实验服上，不用着急处理使
C、轻度烫伤，伤处未破皮时，可涂些紫药水或1%高锰酸钾溶液。
D、酸碱性试剂进入眼睛时，撑开眼睑，用水连续洗涤15分钟，滴加眼药水后送医院诊治。
11、在北京师范大学实验教学中心进行实验操作时，实验室使用过的一次性手套、EP管等废弃物应该丢弃在（ ）
A、医疗废弃物垃圾桶；
B、普通生活垃圾桶
C、利器盒
D、统一收集，统一处理。
12、在北京师范大学实验教学中心进行实验操作时，实验室使用过的注射器、刀片等应丢弃在（ ）
A、利器盒；
B、普通垃圾桶
C、医疗废弃物桶
D、生活垃圾站
13、北京师范大学实验教学中心进行实验操作时，实验垃圾无需进行分类处理
14、进入实验室前，需要提前确认好实验室的安全出口的位置、灭火器所在位置、洗眼器应急冲淋所在位置等。
15、实验室内的消防器材需要放在明显位置，不能随意移动和破坏
16、实验室过道、应急出口处不能随意堆放物品，应该保持畅通
17、进入实验室时，不开始实验的话，可以不配备实验安全用品和安全用具，不做个人防护措施
2 生物化学实验通论
无菌操作及主要仪器设备的使用单元测验
1、使用超净工作台进行无菌操作实验前，至少开启紫外灯照射杀菌
A、5 min
B、15 min
C、30 min
D、10 min
2、制作酒精棉球常用的酒精浓度为
A、50%
B、75%
C、80%
D、95%
3、培养基灭菌的常用方法是
A、紫外线消毒
B、煮沸法消毒
C、高压蒸汽灭菌
D、干热灭菌
4、关于溶液的配制，下列说法正确的是
A、配制溶液时，一般先调pH，然后定容。
B、称取微量药品时，一般用分析天平称量。
C、配制测活液母液时，pNPP在溶液中易分解，需要现用现加。
D、配制的溶液，可以不用调pH直接使用。
5、使用离心机时，一定要将同样重量的离心管对称放入离心转子内让离心机的轴受力平衡。
6、电子天平使用时一定要调水平，并依据称量需求选择不同精度和量程的天平。
7、高压灭菌结束后，压力降到0 Mpa时就可以从高压锅内取出灭菌物品。
8、使用酸度计pH时，由于pH电极泡一般是玻璃的，容易破裂，酸度计pH电极不要触碰到磁子，也不要触碰到容器如烧杯底部。
9、核酸蛋白检测仪又称紫外检测仪，是生物化学实验或液相色谱实验中常用的一种紫外检测仪，常用于检测蛋白核酸的分离纯化。
10、分离纯化碱性磷酸酶等生物分子时，常用一套完整的由层析柱、 梯度混合器、 恒流泵、 核酸蛋白检测仪与记录仪、自动部份收集器串联组成的蛋白纯化系统，实现生物分子分离纯化过程的半自动化及其时时监控。
3. 碱性磷酸酶AKP的原核表达
基因表达测验
1、外源蛋白可以通过下列哪种途径表达
A、大肠杆菌
B、啤酒酵母
C、昆虫细胞
D、哺乳动物细胞
2、T7 表达体系里面包括什么
A、T7 启动子
B、T7 RNA 聚合酶
C、T4 DNA 连接酶
D、lac 启动子
3、如果蛋白在37°C下无法可溶表达，可以从采取如下步骤
A、低温表达
B、高温表达
C、溶解包涵体
D、加入过量IPTG
4、LB培养基成分包括什么
A、酵母提取物
B、胰蛋白胨
C、NaCl
D、琼脂
5、培养过夜的菌液扩大培养后，等OD600到达如下什么值时比较适合诱导
A、0.1
B、0.8
C、1.0
D、3.0
6、从肝脏中直接提取的蛋白其来源属于天然来源。
7、使用IPTG诱导外源基因表达时，应该预先筛选IPTG浓度。
8、使用T7表达系统的原因是因为T7RNA聚合酶保真性好。
9、在T7表达系统中，T7RNA聚合物本身的表达无需诱导。
10、如果蛋白无法可溶表达，有时候可以加上一个标签使它以融合蛋白的形式表达可以得到可溶的表达产物。
4. AKP的分离纯化
AKP纯化测验
1、细胞破碎的正确方法包括
A、超声破碎
B、高压挤压
C、加入噬菌体
D、激光
2、下面哪种层析技术中蛋白是先被吸附到了介质上
A、分子筛层析
B、离子交换层析
C、亲和层析
D、疏水层析
3、下面哪种层析方法不会稀释产物
A、分子筛层析
B、离子交换层析
C、疏水层析
D、亲和层析
4、下面哪种方法是常用浓缩蛋白的方法
A、超滤
B、盐析
C、真空冷冻干燥
D、蒸发浓缩
5、在pH 7.0的缓冲条件下，下面哪种等电点的蛋白可以用阴离子交换树脂分离纯化
A、4.0
B、5.0
C、7.0
D、8.0
6、蛋白的哪种特性可以用来粗纯化
A、热稳定性
B、等电点
C、是否结合金属
D、疏水性
7、蛋白哪种性质可以用来设计层析实验对其进行纯化
A、与特定抗体结合
B、分子大小
C、热稳定性
D、等电点
8、如果蛋白可以利用亲和层析分离纯化，那么通常会首先考虑亲和层析。
9、设计纯化实验时，尽量不要利用相似原理的纯化步骤进行多步纯化。
10、在超声破碎时，可以连续超声5分钟，这样可以快速完成细胞破碎。
5. AKP蛋白纯化方案的评估
蛋白纯化方案分析测验
1、下面哪些是我们需要评估的指标
A、蛋白纯度
B、蛋白回收率
C、提纯倍数
D、蛋白分子量
2、我们进行了如下提纯，纯化步骤顺序为从A到D，每步我们都列出了其产物所测到的比活力（单位为 U. mg-1）。那么哪几步纯化是有效的
A、1000
B、15000
C、40000
D、39000
3、下面哪种方法能够评估蛋白的样品均一性
A、SDS-PAGE
B、Native PAGE
C、分子筛层析
D、酶活测定
4、下面哪种方法不能够评估蛋白的纯度
A、SDS-PAGE
B、酶活测定
C、质谱
D、离子交换层析
5、如果有一个蛋白A， 其分子量为40 KD。 它在Native PAGE上产生两条条带，下面哪种说法有可能具有合理性
A、两条条带分别为单体和二聚体
B、两条条带分别为单体和某个降解产物
C、两条条带分别为单体和四聚体
D、两条条带分别为二聚体和四聚体
6、纯化蛋白时不一定是越多的纯化步骤效果就越好。
7、如果在SDS-PAGE上看到一条条带，我们可以断定该蛋白的纯度已经达到100%。
8、通过SDS-PAGE我们可以判断蛋白单体的分子量。
9、Native PAGE不能用于判定蛋白的分子量。
10、通过Native PAGE我们可以判定蛋白为几聚体。
6. 蛋白浓度及酶活性的测定
酶活性的测定单元测验
1、以下测活方法中，最常用的是
A、分光光度法
B、荧光法
C、同位素测定法
D、电化学法
2、测活时，需要测定酶促反应的初速率，其目的是
A、节约底物
B、尽快完成实验
C、减少其它因素影响
D、准确反映酶的真实催化能力
3、乳酸脱氢酶催化的反应中，通过测定，得知在最适反应条件下，在0.1ml酶样品的作用下，每10分钟有0.3摩尔的丙酮酸分子被还原为乳酸，则1 ml酶样品所含的酶活力国际单位（IU）数为
A、3，000
B、30，000
C、300，000
D、3，000，000
4、以下步骤中，连续法测活的正确顺序为何？ ①利用分光光度计连续测定吸光度的变化 ②将适量酶加入底物溶液中，快速混合 ③利用吸光度变化的动力学曲线计算酶活力 ④将酶与底物的混合液迅速转移入比色杯中，放入分光光度计
A、①②③④
B、②④①③
C、③④①②
D、②①④③
5、在用终止法测定酶活力时，以下哪些物质可用于配制终止液
A、蛋白变性剂
B、酶抑制剂
C、酶激活剂
D、金属离子螯合剂
6、下列关于酶活力测定的描述中，错误的是
A、酶活力的大小可通过测定反应物浓度的减少量或产物浓度的增加量来确定
B、1个酶活力国际单位是指在最适反应条件下，1 分钟内能催化1mol底物转化为产物所需的酶量
C、酶促反应速率越快，表明酶活力越高
D、酶活力测定的最适温度通常是37摄氏度
7、在测定酶活力的实验中，将底物溶液加入酶溶液中。
8、在测定酶活力的实验中，底物的数量与酶的数量相比是过量的。
9、在测定酶活力时，通常测定产物浓度的变化，用于计算酶活力的大小。
10、在利用分光光度法测定酶活力时，吸光度的值总是由小变大。
7. SDS-PAGE法分析AKP的纯化效果
SDS-PAGE 测验
1、下面哪一物质是蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳所不需要的。
A、Tris
B、丙烯酰胺
C、醋酸
D、过硫酸铵
2、SDS处理后蛋白在胶上的迁移率主要受何种因素影响。
A、分子形状
B、分子量
C、所带电荷
D、所有这些
3、一个100KD的蛋白适合有T值为哪个的聚丙烯酰胺凝胶来分离。
A、4%
B、10%
C、15%
D、5%
4、聚丙烯酰胺凝胶电泳四甲基乙二胺TEMED的作用是
A、催化剂
B、加速剂
C、凝固剂
D、交联剂
5、聚丙烯酰胺凝胶电泳过硫酸铵APS的作用是
A、催化剂
B、加速剂
C、交联剂
D、凝固剂
6、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，蛋白样品的迁移率与下列哪个因素有关
A、所带电荷多少
B、分子大小
C、分子形状
D、蛋白浓度
7、对不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳说法不正确的是
A、蛋白先进入分离胶再进入浓缩胶
B、主要用于蛋白质样品的分离与分析
C、包括2层凝胶（分离胶和浓缩胶）
D、凝胶孔径不连续
8、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳不具有下列哪些作用
A、浓缩效应
B、电荷效应
C、疏水效应
D、分子筛效应
9、蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳必须使用SDS，如果没有SDS处理电泳结果毫无意义。
10、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，蛋白的迁移率与其分子量成线性关系。
8. AKP的动力学性质分析
酶促反应动力学测验
1、根据稳态理论，酶促反应开始后，在一定时间内可保持不变的是什么？（这是推导米氏方程的重要前提）
A、[S]
B、[P]
C、[ES]
D、[EP]
2、对于遵守米-曼氏动力学的酶来说，当底物浓度等于2Km时，酶促反应速率与Vmax之比为
A、1/2
B、2/3
C、3/4
D、4/3
3、为测定kcat值，首先需要测定
A、Ki
B、Vmax
C、Km
D、Vmin
4、酶促反应的各动力学参数中，与酶浓度无关的是
A、Ks
B、Vmax
C、Km
D、kcat
5、以下关于Km的描述中，正确的是
A、Km在数值上等于酶促反应速度为最大反应速率一半时的底物浓度
B、Km的大小与酶的浓度有关
C、同一种酶针对不同底物有不同Km值
D、Km值可用来精确地表示酶与底物之间的亲和程度
6、测定底物浓度对酶促反应速率的影响作用时，需要注意的问题包括
A、底物浓度需要过量
B、考虑酶溶液的加入对底物浓度的影响作用
C、严格控制反应条件（温度、pH值等）
D、严格控制反应时间
7、酶促反应过程中，每一时刻的瞬时速率都不一样。
8、如果酶促反应在刚开始的一段时间内反应速率保持不变，则此段时间内的平均速率就能代表反应初速率。
9、测定底物浓度对酶促反应速率的影响作用时，需要保持酶浓度不变。
10、对于遵守米-曼氏动力学的酶来说，在双倒数图中，其动力学曲线与横轴的交点的数值为1/Km。
9. AKP的特性分析
AKP活性影响因素测验
1、酶的反竞争性抑制剂具有下列哪种动力学效应
A、使Vmax'不变，Km'增大
B、使Vmax'减小，Km'不变
C、使Vmax'减小，Km'增大
D、使Vmax'减小，Km'减小
2、在利用酶促反应动力学方法研究抑制剂的作用机制时，所做出的双倒数图中，一组在横轴上交于一点的直线对应
A、竞争性抑制剂
B、非竞争性抑制剂
C、反竞争性抑制剂
D、不可逆抑制剂
3、已知反竞争性抑制剂的浓度 [I] = 2Ki，底物浓度 [S] = 5Km，则根据米氏方程计算出的反应速率v 等于
A、3Vmax/8
B、5Vmax/8
C、3Vmax/16
D、5Vmax/16
4、能够与酶、底物形成三元复合物的抑制剂是
A、竞争性抑制剂
B、非竞争性抑制剂
C、反竞争性抑制剂
D、别构抑制剂
5、以下描述中，属于pH值的变化影响酶活力因素的是
A、pH过高或过低，可导致酶的变性
B、pH的改变影响酶活性部位的构象
C、pH的改变影响与酶催化功能相关的基团的解离状态
D、pH的改变影响产物的解离状态
6、研究抑制剂对酶活力影响作用的实验中，正确的做法是
A、固定酶与底物的浓度不变，只改变抑制剂浓度，测定Km、Vmax等动力学常数
B、严格控制反应条件（温度、pH值等）
C、重复实验，降低偶然误差
D、利用双倒数作图法判断可逆抑制剂的类型
7、竞争性抑制剂的结构与底物具有相似性。
8、非竞争性抑制剂可导致酶的永久性失活。
9、增加测活时间可导致测定出的酶最适温度降低。
10、金属离子的螯合剂是金属酶的激活剂。
学习通生物化学实验_13
实验介绍
本次实验主要介绍了细胞色素C氧化酶的酶促作用以及其对还原剂和氧气的反应机制。实验中使用酶提取液和酶溶液对细胞色素C进行反应，通过测定吸光度变化来研究反应机制。
实验步骤
步骤一：制备酶提取液和酶溶液
将酶提取液和酶溶液分别置于4℃的冰箱保存，避免酶的失活。
步骤二：制备还原剂溶液
将0.1mol/L的谷氨酸钠溶液和0.1mol/L的亚硫酸钠溶液混合制成还原剂溶液。
步骤三：实验操作
- 将细胞色素C溶液加入试管中，加入酶提取液，在30℃的水浴中孵育10分钟。
- 将还原剂溶液加入孵育的试管中，再加入酶溶液，并立即测定吸光度。
- 在5分钟内依次加入氧气气体和亚硫酸钠溶液，再测定吸光度。
实验结果
实验结果表明，细胞色素C氧化酶对还原剂和氧气的反应能够使细胞色素C氧化为高铁血红素。而在反应过程中，酶提取液和酶溶液的存在可以加速酶的反应速率，使得细胞色素C氧化速度加快。
实验分析
细胞色素C氧化酶是一种重要的细胞色素，具有重要的生理作用。在生物体内，细胞色素C氧化酶通过催化氧气和还原剂的反应来促进电子传递，从而维持生命活动的正常进行。由于细胞色素C氧化酶对生物体的重要性，因此对其反应机制的研究具有重要的意义。
通过本次实验的研究，我们得出了细胞色素C氧化酶对还原剂和氧气的反应能够使细胞色素C氧化为高铁血红素的结论。同时，我们还发现，在反应过程中，酶提取液和酶溶液的存在可以使酶的反应速率加快，从而加速细胞色素C的氧化反应。
实验结论
通过本次实验的研究，我们得出了细胞色素C氧化酶对还原剂和氧气的反应能够使细胞色素C氧化为高铁血红素的结论。同时，我们还发现，在反应过程中，酶提取液和酶溶液的存在可以使酶的反应速率加快，从而加速细胞色素C的氧化反应。这些研究结果对于进一步深入了解细胞色素C氧化酶的作用机制具有重要的意义。
